基因表現與分析

 
單點核酸變異偵測 (Single Nucleotide Polymorphism; SNP Detection)
 AcycloPrime™-FP SNP Detection Kits
 單一核酸多樣性 (SNP, single nucleotide polymorphism)檢測系統

 此系統利用基因體放大(ie PCR)包含已知SNPs的核酸片段,來檢測單一核酸多樣性;具簡單的實驗
 原理以及高效率的操作步驟,適合於中小型實驗室使用。
 特點

 •實驗流程簡易-均質的(Homogeneous)實驗方式不需額外的離心,清洗以及分離的步驟,減少
  了樣本盤與盤之間的轉換,降低了成本與時間。
 •實驗方便有彈性-使用一般的分生實驗如PCR及儀器如判讀儀,不需操作複雜的儀器。
 精準的實驗結果-獨特的AcycloTerminators™,提供了高效的精確分析品質。
 快速的實驗結果-搭配操作簡易的VICTOR3偏極化螢光讀取儀器,即可簡便、快速、精確和大量
  自動化的檢測已知SNPs,每一工作日可讀取12,288個樣品結果。
 節省實驗經費-不需額外標定核酸引子,目前市場上最容易供給的SNPs檢測系統。
 可重複讀取偏極螢光值數次-避光的條件下,SNP反應後的樣品可保存於-20℃數天

 分析原理與簡易流程:

 Step1 以聚合酵素連鎖反應從基因體中複製放大含有已知SNP的核酸片段
 Step2 加入PCR Clean-up reagent直接去除未反應的核酸引子片段和核甘酸分子。
 Step3 加入AcycloPrime Reaction Mix和SNP上游的核酸引子,利用DNA模板直接將螢光標定核甘酸阻
    斷子延伸入核酸引子的原理(TDI, Template-directed Dye-terminator Incorporation),延伸一個螢光
    標定核甘酸阻斷子於SNP核酸引子後(如圖A),則核酸片段合成反應停於此(如圖B)。由於SNP
    核酸引子含有20-30個核甘酸分子,一但和螢光分子結合後,此分子的分子量將遠大於游離的
    螢光阻斷子。
 Step4 不需額外清洗和分離的步驟,配合VICTOR3判讀儀,以偏極化螢光原理(請參考FP Principle),
    讀取螢光極值(mP) 經SNPscorer軟體分析,即可偵測SNP類別。

      圖A

    
      圖B
    
                                         下一頁